本文目录一览:
- 1、ECL发光试剂盒AB液混合后就发光正常吗
- 2、为什么Western Blot化学发光(ECL)会出现高背景?
- 3、罗氏发光试剂会断货吗?
- 4、生化试剂和化学发光试剂区别
- 5、Western blot化学发光(ECL)时,条带特别弱势怎么回事啊?有哪些步骤是需要注意的吗?
ECL发光试剂盒AB液混合后就发光正常吗
您要先明白ECL发光液发光原理:一般的发光试剂含鲁米诺和H2O2、发光增强剂等物质。发光试剂中的鲁米诺被HRP和H2O2氧化,产生荧光。所以AB液混合后发光是正常的,但是发光时间长短和发光液有很大关系,好的发光液比如英格恩公司的EnlithtTM,灵敏度高又不容易淬灭,是蛋白检测实验的一大助力。
为什么Western Blot化学发光(ECL)会出现高背景?
Asparcl发光试剂的服务好不好:Western Blot导致“背景高”sparcl发光试剂的服务好不好的原因有很多sparcl发光试剂的服务好不好,主要有以下几个方面:
①. 抗体浓度过高sparcl发光试剂的服务好不好,洗涤不充分,
②. 封闭不充分,会造成抗体在膜上的非特异结合,导致高背景。
③. 使用sparcl发光试剂的服务好不好了不恰当的封闭剂,可尝试不同的封闭剂。
④. 曝光过度,可减少底物显色时间,缩短曝光时间。
⑤. 操作过程中膜干了。确保膜完全浸没于buffer中,始终杜绝膜干。
所以选择好的抗体和发光试剂盒非常关键,抗体技术目前国内还不成熟,建议选择进口试剂,不然容易特异性不好,发光试剂盒技术已经很成熟了,目前国内国外很多公司都研发出了灵敏度很高的试剂盒,进口可以看一下pierce的,但价格较贵,国产可以看一下上海炎熙生物的极敏型ECL试剂盒。和pierce一样是fg级别。很稳定。
罗氏发光试剂会断货吗?
罗氏发光试剂不会断货,因为工厂也在针对市场源源不断的生产。
生化试剂和化学发光试剂区别
生化试剂和化学发光试剂区别为sparcl发光试剂的服务好不好:仪器不同、研发能力不同、检测难度不同。
一、仪器不同
1、生化试剂:生化试剂无需配套特定体外诊断仪器。
2、化学发光试剂:化学发光试剂对整个检测系统sparcl发光试剂的服务好不好的精密度要求高sparcl发光试剂的服务好不好,必须配套特定体外诊断仪器。
二、研发能力不同
1、生化试剂:生化试剂仅具备试剂研发能力即可推向市场。
2、化学发光试剂:化学发光试剂必须具备强有力的仪器研发能力。
三、检测难度不同
1、生化试剂:生化试剂诊断测试的是糖类,脂肪类,在人体内的含量高,检测难度低。
2、化学发光试剂:化学发光试剂诊断测试的是对象抗原、抗体等,在人体内的含量低,检测难度高。
Western blot化学发光(ECL)时,条带特别弱势怎么回事啊?有哪些步骤是需要注意的吗?
条带弱和整张膜发光原因是不同的。条带弱一般是因为表达量低,或者一抗的问题,比如质量不好或浓度太低或孵育时间太短。整张膜发光则是因为发光液的杂质含量太多,一抗洗涤不充分也可能导致整张膜发光。
把一抗、洗涤和封闭的原因排除之后,仍然有整张膜发光,那就是发光液的质量问题。所以选择质量好的发光液关乎实验成败。如果背景不高,条带很弱的话,我们一般是换用高灵敏度的发光液,从超敏的换成极敏的,一般都能解决。